Monitoreo in vivo de las interacciones entre células T y células dendríticas mediante etiquetado enzimático

Giulia Pasqual1, Aleksey Chudnovskiy1, Jeroen M J Tas1

  • 1Laboratory of Lymphocyte Dynamics, The Rockefeller University, 1230 York Avenue, New York, New York, USA.

Nature
|January 18, 2018
PubMed

Insights

Un nuevo método llamado LIPSTIC utiliza la sortasa A bacteriana para etiquetar las interacciones célula-célula in vivo, lo que permite el estudio de la dinámica receptor-ligando en las asociaciones de células inmunes. Esta técnica revela etapas distintas de las interacciones de células dendríticas y células T durante las respuestas inmunes.

Área de la Ciencia:

  • Biología celular
  • Inmunología
  • Biología molecular

Sus antecedentes:

  • Las interacciones célula-célula son cruciales para procesos biológicos como la inmunidad y el desarrollo.
  • La microscopia intravital visualiza la dinámica celular pero no identifica las interacciones específicas receptor-ligando ni permite el aislamiento celular.
  • Los métodos existentes carecen de la capacidad de medir directamente las interacciones receptor-ligando y cuantificar la comunicación intercelular in vivo.

Objetivo del estudio:

  • Desarrollar un nuevo método para identificar y analizar las interacciones receptor-ligando entre las células de los organismos vivos.
  • Caracterizar las distintas modalidades de las interacciones entre células dendríticas y células T CD4+ durante el primado de células T in vivo.
  • Proporcionar una herramienta flexible para cuantificar la comunicación intercelular en varios campos biológicos.

Principales métodos:

  • Etiquetado celular mediado por la sortasa A bacteriana a través de las sinapsis de las células inmunes.
  • Generación de una señal detectable para el análisis de citometría de flujo ex vivo.
  • Aplicación del método de etiquetado de las asociaciones inmunes mediante la clasificación de los contactos intercelulares (LIPSTIC).

Principales resultados:

  • LIPSTIC etiqueta con éxito las interacciones de "besar y huir" entre las células inmunes in vivo.
  • Se identificaron dos modalidades distintas de interacción entre las células dendríticas y las células T CD4+ durante la preparación de las células T.
  • Se ha demostrado que las primeras interacciones implican la unión CD40-CD40L congénita, mientras que las interacciones posteriores no son congénitas.

Conclusiones:

  • LIPSTIC permite la medición directa de las interacciones dinámicas entre células, tanto in vitro como in vivo.
  • El método facilita la identificación de pares específicos receptor-ligando involucrados en la comunicación intercelular.
  • La flexibilidad de LIPSTIC lo hace aplicable a diversos campos que requieren la cuantificación de la comunicación celular.
Abstracto

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