細胞間酵素ラベリングによるT細胞-デンドリット細胞の相互作用のインビボモニタリング

科学分野:

• 細胞生物学
• 免疫学
• 分子生物学

背景:

• 細胞同士の相互作用は 免疫や発達といった 生物学的プロセスに不可欠です
• 細胞内顕微鏡は細胞動態を可視化しますが,特定の受容体-リガンドの相互作用を特定したり,細胞の隔離を許可しません.
• 既存の方法は,受容体-リガンドの相互作用を直接測定し,細胞間通信をin vivoで定量化する能力がない.

研究 の 目的:

• 生体内の細胞間の受容体-リガンドの相互作用を特定し,分析するための新しい方法を開発する.
• T細胞の原始化過程における dendritic 細胞と CD4+ T 細胞の相互作用の異なる様式を特徴づける.
• 生物学の様々な分野における細胞間通信を定量化するための柔軟なツールを提供すること.

主な方法:

• バクテリアのソルターゼAが免疫細胞のシナプスを経由して細胞を標識する.
• エクビオフローサイトメトリー分析のための検出可能な信号の生成.
• "細胞間接触の分類による免疫パートナーシップの標識" (LIPSTIC) の適用

主要な成果:

• LIPSTICは免疫細胞間の"キス・アンド・ラン"の相互作用を in vivoで成功裏に標識しています.
• T細胞のプリミング中に2つの異なる相互作用の様式を特定した.
• 早期の相互作用は同種のCD40- CD40L結合を伴うが,後の相互作用は同種ではないことが示された.

結論:

• LIPSTICは,細胞間相互作用のダイナミクスを in vitro と in vivo で直接測定することができます.
• この方法は,細胞間通信に関与する特定の受容体-リガンドのペアの識別を容易にする.
• LIPSTICの柔軟性により,細胞通信の定量化を必要とする様々な分野に適用できます.