一个偏离的细胞系统,容易接受流感病毒感染的亚细胞分辨率成像

Jean-Baptiste Brault1, Catherine Thouvenot2, Magda Cannata Serio1

  • 1Institut Pasteur, Université Paris Cité, CNRS UMR 3569, RNA Biology of Influenza Viruses, Paris, France.

PloS one
|January 25, 2024
PubMed

Insights

这项研究引入了流感A病毒 (IAV) 感染的3D细胞培养模型,使得病毒基因组在两极化呼吸道细胞内更好地可视化. 这种先进的模型克服了传统的2D培养研究IAV病变的局限性.

科学领域:

  • 病毒学 病毒学
  • 细胞生物学 细胞生物学
  • 生物技术是生物技术.

背景情况:

  • 流感A病毒 (IAV) 细胞内贩运依赖宿主细胞细胞骨和内膜系统.
  • 传统的二维细胞培养缺乏自然呼吸道上皮细胞的两极化结构,限制了IAV感染的机制研究.
  • 在2D模型中IAV的亚细胞成像不反映体内细胞组织.

研究的目的:

  • 开发一个3D细胞培养系统,用于研究流感A病毒感染.
  • 为了在IAV感染期间沿着极化细胞的底侧轴进行亚细胞成像.
  • 为IAV发病学研究提供一个更具生理相关性的模型.

主要方法:

  • 在Cytodex-3微载体珠子上培养两极化Caco2-TC7上皮细胞单层.
  • 将这些3D培养细胞感染流感A病毒.
  • 在受感染的极化细胞上进行免疫染色,共聚焦成像和电子显微镜.

主要成果:

  • 成功建立了一个3D细胞培养系统,用于感染IAV的两极化上皮细胞.
  • 在3D模型中,沿着巴索侧轴进行细胞下分辨率成像的演示.
  • 在极化环境中可视化IAV与宿主细胞相互作用的协议的验证.

结论:

  • 开发的3D细胞培养试验克服了用于研究IAV细胞内贩运的2D模型的局限性.
  • 这种方法可以对感染IAV的偏振人类上皮细胞进行先进的成像.
  • 该协议可以适应研究其他感染偏振上皮细胞的病原体.
抽象的

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