在培养细胞,组织部分和基因相染色体扩散中进行代间接免疫光成像的协议

Jeffrey Hsu1, Kimberly T Nguyen1, Magda Bujnowska1

  • 1Medical Scientist Training Program, University of Virginia, Charlottesville, VA 22908, USA; Department of Biochemistry and Molecular Genetics, University of Virginia, Charlottesville, VA 22908, USA.

STAR protocols
|July 13, 2024
PubMed

Insights

本研究介绍了用于高分辨率空间生物学的代间接免疫光 (4i). 该协议可以在细胞,组织和染色体中进行多重成像,从而促进细胞和亚细胞数据生成.

科学领域:

  • 空间生物学 空间生物学
  • 细胞和亚细胞成像成像
  • 分子病理学分子病理学

背景情况:

  • 产生高分辨率的空间数据对于理解细胞功能和疾病机制至关重要.
  • 现有的方法往往缺乏用于详细空间分析所需的复杂化能力或分辨率.
  • 代间接免疫光 (4i) 为克服这些局限性提供了一个有希望的方法.

研究的目的:

  • 通过代间接免疫光 (4i) 来生成高度多重化的空间数据的简化协议.
  • 证明4i协议在各种生物样本上的适应性,包括培养细胞,FFPE组织和染色体扩散.
  • 为准备样品,染色,成像,化和图像处理提供详细的程序,用于高通量分析.

主要方法:

  • 代间接免疫光 (4i) 成像协议.
  • 用于固定培养细胞,FFPE组织切片和基因相染色体扩散的样品制备.
  • 抗体和DNA染色,免疫光成像,抗体化和图像处理.

主要成果:

  • 一个强大的协议,用于在细胞和亚细胞分辨率生成高度多重化的空间数据.
  • 在各种样本类型中成功应用4i协议,解决自发光和染色体脆弱性等特定挑战.
  • 简化程序,促进空间生物信息的高通量分析.

结论:

  • 提出的4i协议为高分辨率空间数据生成提供了一种多功能和高效的方法.
  • 这种技术显著提高了多重成像能力在不同的生物环境.
  • 该协议适用于高通量应用,为深入了解细胞和亚细胞组织铺平了道路.
抽象的

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