脱细胞化淋巴结段与保存的细胞外基质用于树突细胞培养

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物材料科学 生物材料科学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 淋巴结 (LN) 细胞外基质 (ECM) 对适应性免疫至关重要,指导免疫细胞相互作用.
• 癌症和炎症中的ECM干扰促进了疾病的进展.
• 由于模型的局限性和对动物研究的依赖,研究LN ECM-细胞相互作用是具有挑战性的.

研究的目的:

• 开发一种创新的方法,用于创建薄而无细胞的淋巴结支架,用于研究本地微环境.
• 克服现有的全器官脱细胞化技术的局限性,这些技术阻碍了细胞播种,营养扩散和成像.

主要方法:

• 在小鼠和人类的LNS上,结合振动组切割 (200-μm切片) 与洗剂脱细胞化 (0.1% SDS,1% Triton-X).
• 对于ECM蛋白质含量 (原蛋白,GAG,其他ECM蛋白质) 的特征脱细胞化支架.
• 在支架上培养了纤维细胞网状细胞 (FRC) 21天,并进行了FRC-T细胞共同培养.

主要成果:

• 脱细胞化的LN切片保留了与原生组织相比的原蛋白和糖氨基甘油 (GAG) 度.
• 免疫光检测证实了脱细胞化的支架中存在各种ECM蛋白质.
• 支架支持长期FRC培养,FRC-T细胞共培养和高分辨率成像.
• 与2D培养相比,在支架上培养的FRC中发现了改变的gp38和PDGFRα表达.

结论:

• 薄,脱细胞化的LN切片为研究LN ECM-细胞相互作用提供了可行的模型.
• 这种方法促进了先进的分析,如高分辨率成像和流细胞计.
• 开发的支架为研究生物模拟LN微环境中的免疫细胞行为提供了一个有前途的平台.