通过使用高通量单B细胞技术,对杀虫病毒中的糖蛋白E2域B/C的抗体多样性进行表征

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 经典猪瘟病毒 (CSFV) 对猪群构成重大威胁.
• E2蛋白的B/C域是中和抗体的关键目标.
• 开发有效的诊断工具和疫苗需要了解CSFV抗原性.

研究的目的:

• 识别和描述针对CSFV E2蛋白B/C域的单克隆抗体 (mAbs).
• 利用微流体单B细胞技术加速抗体发现.
• 在CSFV E2 B/C域内调查潜在的泛虫害病毒表位.

主要方法:

• 使用定制免疫策略与高通量,基于微流体的单个B细胞平台相结合.
• 隔离了4241个抗原特异性血细胞,并进行了下一代测序,以获得82个配对的抗体序列.
• 对81mAbs进行了结合性测定,以评估它们对CSFV E2蛋白变体和相关的杀虫病毒的反应性.

主要成果:

• 确定了38个与CSFV E2 B/C域结合的mAbs,其中14个特定于基因型2的QZ07-E2.2.
• 发现24mAbs对基因型2QZ07-E2和基因型1C-E2都有反应,其中8个对其他杀虫病毒具有交叉反应.
• 对与结合特征相关的CDR序列的遗传学分析,表明有三种不同的抗体群.

结论:

• 该研究在CSFV E2 B/C域中发现了新的,广泛反应的泛虫害病毒表位.
• 与高通量测序集成的微流体显著加快了抗体发现.
• 这种方法为开发诊断试验和下一代抗虫病毒标记疫苗提供了一个强大的平台.