Establecimiento de silenciamiento de la transcripción en ausencia de replicación del ADN

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética de la levadura Genética de la levadura
• La epigenética es la epigenética.

Sus antecedentes:

• El silenciamiento transcripcional de los loci de tipo de apareamiento en Saccharomyces cerevisiae es esencial para la determinación del tipo de célula de la levadura.
• Se sabe que este proceso de silenciamiento depende de un paso de establecimiento regulado por el ciclo celular, que a menudo se presume que implica la replicación del ADN.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel directo de la replicación del ADN en el establecimiento del silenciamiento en los loci. tipo de apareamiento de levadura.
• Para determinar si el silenciamiento puede establecerse en ausencia de replicación del ADN.

Principales métodos:

• Utilizó la recombinación específica del sitio para generar una molécula de ADN circular no replicante (anillo) in vivo.
• Atado el factor de silenciamiento Sir1 al anillo de ADN para activar un silenciador inactivo.
• Se analizaron las características estructurales del anillo de ADN silenciado, incluyendo el superenrolamiento del ADN y los niveles de acetilación de histonas.

Principales resultados:

• Demostró que el silenciamiento de la transcripción puede establecerse en el ADN que no se somete a replicación.
• El anillo de ADN silenciado exhibió características de la cromatina silenciosa auténtica, como el superenrolamiento alterado y la reducción de la acetilación de histonas.
• El establecimiento de silenciamiento requería la presencia de los factores de silenciamiento Sir2, Sir3 y Sir4 y se produjo entre las primeras fases S y M del ciclo celular.

Conclusiones:

• El paso de un tenedor de replicación no es el evento del ciclo celular necesario para establecer el silenciamiento en la levadura.
• Estos hallazgos desafían la suposición de larga data que vincula la replicación del ADN con el establecimiento del silenciamiento.
• Sugiere que mecanismos alternativos dependientes del ciclo celular median el establecimiento de la cromatina silenciosa.