Actividad de la histona metiltransferasa de un complejo represor del grupo Drosophila Polycomb

Área de la Ciencia:

• Biología del desarrollo Biología del desarrollo.
• La epigenética es la epigenética.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• Las proteínas del grupo policómbico (PcG) son esenciales para mantener la represión transcripcional durante el desarrollo.
• Las proteínas PcG establecen estados cromatínicos represivos, pero la composición exacta y las funciones bioquímicas de los complejos clave siguen sin estar claras.
• Las proteínas Extra Sex Combs (ESC) y Enhancer of Zeste [E(Z) ] son componentes centrales de un complejo crítico de PcG.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar la composición y la actividad bioquímica del complejo de grupo de policombos ESC-E(Z).
• Para determinar si la proteína E(Z) posee actividad enzimática, específicamente la función de la histona metiltransferasa.
• Para investigar el papel de la metilación de histonas en el silenciamiento de genes mediado por PcG.

Principales métodos:

• Purificación del complejo ESC-E(Z) a partir de embriones de Drosophila.
• Reconstitución de un complejo recombinante utilizando subunidades purificadas.
• Ensayos in vitro de la metiltransferasa utilizando el complejo reconstituido.
• Análisis de la actividad de la proteína mutante E(Z) y la represión génica in vivo.

Principales resultados:

• El complejo purificado ESC-E (((Z) comprende cuatro subunidades: ESC, E (((Z), NURF-55, y SU (((Z) 12.
• El complejo reconstituido exhibe actividad de la metiltransferasa, específicamente la metilación de la lisina-27 de la histona H3.
• Las mutaciones en el dominio E(Z) SET eliminan la actividad de la metiltransferasa in vitro.
• La interrupción de la función del dominio E(Z) SET conduce a una disminución de la represión del gen HOX in vivo.

Conclusiones:

• La proteína Enhancer of Zeste [E(Z] se identifica como una proteína del grupo Polycomb con actividad enzimática de la metiltransferasa.
• La metilación de la histona H3 lisina-27 está implicada como un mecanismo clave en el silenciamiento transcripcional mediado por Polycomb.
• Este estudio proporciona evidencia bioquímica que vincula la composición del complejo PcG con la regulación epigenética del desarrollo.