Colorantes sensibles a los disolventes para reportar cambios en la conformación proteica de las células vivas

Área de la Ciencia:

• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología celular Biología celular.
• Biología Química Biología química.

Sus antecedentes:

• Los tintes fluorescentes son cruciales para el monitoreo de la dinámica de las proteínas.
• Los tintes existentes a menudo carecen de las propiedades necesarias para la obtención de imágenes de células vivas y el análisis cuantitativo.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar nuevos colorantes de merocianina para la obtención de imágenes en células vivas de la actividad de las proteínas.
• Para crear tintes con sensibilidad al disolvente para informar los cambios en el entorno de las proteínas.
• Para permitir la fijación covalente selectiva en el sitio a las proteínas.

Principales métodos:

• Síntesis de nuevos colorantes merocianinas con propiedades fotofísicas específicas.
• Derivación con iodoacetamida y éster de succinimidil para el etiquetado de proteínas covalentes.
• Desarrollo de un biosensor para la activación de Cdc42 utilizando los nuevos colorantes.

Principales resultados:

• Los nuevos tintes exhiben una fuerte dependencia del rendimiento cuántico en la polaridad / viscosidad del disolvente.
• Los tintes poseen excelentes propiedades fotofísicas, fotostabilidad y solubilidad en agua.
• Un biosensor de activación de Cdc42 mostró un aumento de fluorescencia de 3 veces después de la unión a GTP.

Conclusiones:

• Los tintes de merocianina desarrollados son adecuados para la imagen de células vivas de las actividades de las proteínas.
• Estos tintes se pueden utilizar para crear biosensores versátiles para diversos procesos celulares.
• Los hallazgos avanzan en el estudio de los cambios conformacionales de las proteínas y las interacciones en las células vivas.