Polyubiquitination de p53 por una actividad de la ligasa de la ubiquitina de p300

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Oncología Oncología.
• Bioquímica de las proteínas Bioquímica de las proteínas

Sus antecedentes:

• La proteína supresora de tumores p53 sufre una rápida rotación, un proceso regulado por la MDM2 ubiquitina ligasa.
• Tanto la p53 como la MDM2 interactúan con los coactivadores transcripcionales de las proteínas de unión p300/CREB.
• La oncoproteína E1A que se une a p300 estabiliza p53, lo que sugiere el papel de p300 en la degradación de p53.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el papel de p300 en la ubiquitinación y degradación de p53.
• Para aclarar la interacción entre p300, MDM2 y E1A en la regulación de la estabilidad de p53.

Principales métodos:

• Ensayos de ubiquitinación in vitro utilizando p300 purificado y MDM2.2.
• Análisis del estado de ubiquitinación de p53 en células que expresan E1A.
• Evaluación de la actividad intrínseca de la ubiquitina ligasa de p300 y la inhibición por E1A.

Principales resultados:

• La p300 purificada demostró actividad intrínseca de la ubiquitina ligasa, que fue inhibida por E1A.
• p300 y MDM2 juntos catalizaron la poliubiquitinación de p53 in vitro.
• El MDM2 por sí solo catalizó la monoubiquitinación de p53 in vitro.
• La expresión de E1A en las células redujo los niveles de p53 poliubiquitinado pero no los de p53 monoubiquitinado.

Conclusiones:

• Las actividades de la ubiquitina ligasa tanto de MDM2 como de p300 son esenciales para generar p53 poliubiquitinado.
• La poliubiquitinación apunta a p53 para la degradación mediada por el proteasoma.
• E1A influye en la degradación de p53 mediante la modulación del papel de p300 en la poliubiquitinación.