La enzima RecBCD es una helicasa de ADN bipolar

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Enzimología Enzimología.
• Reparación del ADN Reparación del ADN

Sus antecedentes:

• Escherichia coli RecBCD es una enzima clave en la reparación del ADN.
• Procesa las rupturas de doble hebra para la recombinación homóloga.
• Se sabía que la subunidad RecB tenía actividad de 3' a 5' helicasa.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la actividad de helicasa de la subunidad RecD.
• Para dilucidar el mecanismo de desenrollamiento del ADN por la holoenzima RecBCD.

Principales métodos:

• Purificación de la proteína RecD.
• Los ensayos de actividad enzimática con RecBCD. intacto y mutado.
• Estudios de translocación y desenrollo del ADN.

Principales resultados:

• La proteína RecD purificada exhibe una actividad de 5' a 3' de la DNA helicasa.
• Tanto las helicasas RecB como las RecD son activas en la enzima RecBCD intacta.
• RecBCD permanece activo para el desenrollamiento del ADN incluso cuando RecB o RecD está mutado.

Conclusiones:

• RecBCD funciona a través de un modelo de translocación bipolar.
• Dos helicasas de ADN (RecB y RecD) se mueven en la misma dirección pero con polaridades opuestas.
• Este mecanismo explica la alta velocidad, procesividad y función de RecBCD en la reparación del ADN.