Ras es esencial para la fosforilación de la tirosina inducida por el factor de crecimiento nervioso y el éster de...

Área de la Ciencia:

• Las vías de señalización celular.
• Biología molecular La biología molecular.
• La neurociencia es la neurociencia.

Sus antecedentes:

• El tratamiento del factor de crecimiento nervioso (NGF) de las células PC12 desencadena una rápida fosforilación de la proteína tirosina.
• El papel de la señalización Ras en la mediación de las respuestas celulares inducidas por el NGF requiere una mayor aclaración.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el papel de Ras en la fosforilación de tirosina inducida por NGF y TPA.
• Para identificar las proteínas específicas reguladas por Ras en respuesta a la estimulación de NGF y TPA.

Principales métodos:

• Las células PC12 fueron transfectadas con mutantes Ras inhibidores o oncogénicos dominantes.
• Se evaluaron los niveles de fosforilación de tirosina de las proteínas celulares.
• La inmunoprecipitación y el Western blotting se utilizaron para identificar las fosfoproteínas.
• La actividad de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK) se midió mediante ensayos de quinasa in vitro.

Principales resultados:

• La señalización Ras bloqueó específicamente la fosforilación de tirosina inducida por NGF y TPA de las proteínas de 42 y 44 kDa.
• Expresión de la fosforilación de tirosina inducida por Ras oncogénico de estas mismas proteínas.
• La proteína de 44 kDa fue identificada como kinasa regulada por la señal extracelular 1/MAPK, y la proteína de 42 kDa comigrada con MAPK.
• La activación de MAPK regulada por Ras, pero no la activación de Trk inducida por NGF o la fosforilación PLC-gamma 1.

Conclusiones:

• Ras juega un papel crítico en la fosforilación de tirosina de las MAPK inducidas por NGF y TPA.
• La fosforilación de tirosina inducida por NGF ocurre tanto aguas arriba como aguas abajo de la señalización Ras.
• Las MAPK son efectores clave de Ras en respuesta al NGF y al TPA en las células PC12.