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Raf-1 activa la kinasa kinasa de MAP, también conocida como kinasa-MAP.

J M Kyriakis1, H App, X F Zhang

  • 1Diabetes Unit, Medical Services, Massachusetts General Hospital, Charlestown 02129.

Nature
|July 30, 1992
PubMed
Resumen
Este resumen es generado por máquina.

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El producto del protooncogén c-raf-1, una proteína quinasa serina/treonina, activa directamente la MAP quinasa-quinasa (MAPK-K). Este hallazgo identifica a MAPK-K como el primer sustrato fisiológico de c-Raf-1, aclarando un paso clave en las vías de señalización celular.

Área de la Ciencia:

  • Biología celular Biología celular.
  • Oncología Molecular Oncología Molecular
  • Transducción de señales Transducción de señales.

Sus antecedentes:

  • El protooncogén c-raf-1 codifica una proteína quinasa serina/treonina activada por estímulos extracelulares.
  • Los sustratos fisiológicos de c-Raf-1, una molécula clave de señalización, siguen siendo en gran medida desconocidos.
  • Las kinasas de proteínas activadas por mitógenos (MAP) Erk1 y Erk2 se activan a través de la fosforilación por la MAP quinasa-quinasa (MAPK-K).

Objetivo del estudio:

  • Para identificar los sustratos fisiológicos de la c-Raf-1 proteína quinasa.
  • Investigar el papel de c-Raf-1 en la activación de MAPK-K y Erk1/2.2.
  • Para dilucidar los activadores aguas arriba de MAPK-K en la señalización celular.

Principales métodos:

Videos de Experimentos Relacionados

  • Análisis de MAPK-K y Erk1/2 constitutivamente activos en células transformadas en v-raf.
  • Ensayos enzimáticos utilizando MAPK-K parcialmente purificado y fosfatasa 2A.
  • Ensayos de kinasa in vitro con c-Raf-1 purificado para evaluar la reactivación de MAPK-K.
  • Cromatografía de intercambio catiónico para caracterizar MAPK-K y su interacción con c-Raf-1.

Principales resultados:

  • Se encontró que MAPK-K y Erk1/2 son constitutivamente activos en las células transformadas en v-raf.
  • La fosfatasa 2A desactivó el MAPK-K, pero el c-Raf-1 purificado podría reactivarlo in vitro.
  • c-Raf-1 medió la fosforilación selectiva de un polipéptido de 50.000 M(r) co-elutado con MAPK-K.
  • Estos hallazgos demuestran c-Raf-1 como un activador inmediato aguas arriba de MAPK-K.

Conclusiones:

  • c-Raf-1 se identifica como el activador directo aguas arriba de MAPK-K.
  • MAPK-K es el primer sustrato fisiológico identificado del producto del protooncogén c-raf-1.
  • Este estudio aclara un paso crítico en la cascada de señalización de la quinasa MAP regulada por c-Raf-1.