Activación de la proteína quinasa kinasa activada por mitógeno por v-Raf en las células 3T3 de NIH e in vitro

Área de la Ciencia:

• La señalización celular de las células.
• Biología molecular La biología molecular.
• La oncogénesis es la oncogénesis.

Sus antecedentes:

• Las proteínacinasas activadas por mitógeno (MAP) son proteínacinasas serina-treonina activadas por los factores de crecimiento.
• Las quinasas MAP juegan un papel crítico en la proliferación y diferenciación celular.
• La activación constitutiva de las vías de señalización puede conducir a la oncogénesis.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel del oncogénico c-Raf-1 en la activación de la señalización de la quinasa MAP.
• Para determinar si las proteínas v-Raf pueden activar la MAP quinasa quinasa.

Principales métodos:

• Las células 3T3 de NIH fueron infectadas con virus que codifican el oncogénico c-Raf-1.
• La actividad de la MAP quinasa y la MAP quinasa quinasa se evaluó en células infectadas.
• Se realizaron ensayos de quinasa in vitro utilizando proteínas v-Raf purificadas y MAP quinasa del músculo esquelético.

Principales resultados:

• Se observó activación constitutiva de la MAP quinasa y la MAP quinasa quinasa en las células NIH 3T3 que expresan el oncogénico c-Raf-1.
• Las proteínas v-Raf purificadas activaron la MAP quinasa quinasa del músculo esquelético in vitro.
• Una proteína de fusión v-Raf expresada bacterialmente también demostró actividad activadora de la MAP quinasa quinasa.

Conclusiones:

• Las formas oncogénicas de c-Raf-1 conducen a la activación constitutiva de la vía de la quinasa MAP.
• Las proteínas v-Raf directamente fosforilan y activan la MAP quinasa quinasa.
• Esto sugiere una función clave de c-Raf-1 en la mediación de la señalización mitogénica a través de la activación de la MAP quinasa quinasa.