Sensibilidad atomolar en bioensayos basados en espectroscopia de fluorescencia plasmónica de superficie

Área de la Ciencia:

• La biofísica es la biofísica.
• Química Analítica La Química Analítica es la
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La pérdida de fluorescencia inducida por el metal y la dependencia de la distancia del rendimiento de fluorescencia complican la detección de ultrasonidos.
• La espectroscopia de fluorescencia plasmónica de superficie (SPFS) requiere condiciones optimizadas para la detección sensible.
• Las matrices de Dextran se utilizan en biosensing para la inmovilización y la mejora de la señal.

Objetivo del estudio:

• Para reducir la pérdida de fluorescencia inducida por el metal y la dependencia de la distancia en SPFS utilizando una matriz de dextrano.
• Para optimizar el límite de detección (LOD) para SPFS.
• Para demostrar las capacidades de detección de ultrasonidos de un inmunoensayo directo.

Principales métodos:

• Utilizó una matriz de carboximetil dextrano en un chip de sensor CM5 para la inmovilización covalente de IgG. de ratón.
• Empleó Alexa-Fluor 647 como la etiqueta fluorescente para el anticuerpo secundario.
• Se realizó una detección de ultrasonidos con resolución temporal utilizando espectroscopia de fluorescencia de plasma de superficie.

Principales resultados:

• Reducción significativa de la pérdida de fluorescencia inducida por el metal y la convulsa dependencia de la distancia del rendimiento de fluorescencia.
• Se alcanzó un límite de detección de 500 aM (10^-18 M) para el anticuerpo anti-ratón de conejo.
• Se ha demostrado una tasa de unión de aproximadamente 10 moléculas mm^-2 min^-1.

Conclusiones:

• La matriz de dextrano mitiga efectivamente el apagado de la fluorescencia en SPFS.
• El sistema de modelo desarrollado permite la detección de anticuerpos por ultrasonidos de alta sensibilidad.
• Este enfoque mejora la evaluación de LOD para SPFS, aplicable al desarrollo del inmunoensayo directo.