La actividad de la glicosilasa del ADN de Uracil es prescindible para el interruptor de clase de inmunoglobulina

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• La recombinación del interruptor de clase de inmunoglobulina (CSR, por sus siglas en inglés) es un proceso crítico en la inmunidad adaptativa.
• La desaminasa citidina inducida por activación (AID) es fundamental para la RSC, ya que inicia modificaciones en el ADN.
• Se supone que la AID desaminará la citosina, generando uracilo (U) en el ADN, que luego será procesado por la glicosilasa de ADN de uracilo (UNG).

Objetivo del estudio:

• Para investigar el papel de la glicosilasa de ADN de uracilo (UNG) en el paso de escisión del ADN de la RSC.
• Aclarar el mecanismo por el cual UNG participa en la RSE.
• Reevaluar el modelo establecido de desaminación del ADN por AID durante la RSE.

Principales métodos:

• Utilizó la formación de foco de histona fosforilada gamma-H2AX como un marcador para la escisión del ADN.
• Empleó el inhibidor de UNG Ugi para evaluar su impacto en la escisión del ADN y la RSC.
• Se generaron y probaron mutantes UNG deficientes en la eliminación de uracilo en las células UNG-/-B.

Principales resultados:

• El inhibidor de UNG Ugi no impidió la escisión del ADN en el locus de la cadena pesada de inmunoglobulina (IgH) durante la RSC.
• El tratamiento con Ugi bloqueó la unión de UNG al ADN e inhibió significativamente la RSC.
• Los mutantes UNG incapaces de eliminar el uracilo rescataron la CSR en las células UNG-/-B.

Conclusiones:

• UNG está implicado en la fase de reparación de la RSE a través de un mecanismo no caracterizado.
• La eliminación de uracil por UNG es indispensable para el paso de escisión del ADN en la RSC.
• Estos hallazgos requieren una reevaluación del modelo que describe la desaminación del ADN por AID en RSE.