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Updated: Jul 13, 2026

EPR Monitored Redox Titration of the Cofactors of Saccharomyces cerevisiae Nar1
Published on: November 26, 2014
EPR y evidencia espectroscópica infrarroja de que se forma un intermediario paramagnético cinéticamente competente
Simon J George1, Javier Seravalli, Stephen W Ragsdale
1Physical Biosciences Division, Lawrence Berkeley National Laboratory, Berkeley, California 94720, USA.
La deshidrogenasa de monóxido de carbono/acetil-CoA sintasa (CODH/ACS) es crucial para el crecimiento autotrófico. Este estudio identifica las especies de NiFeC como la forma primaria cuando el ACS reacciona con el monóxido de carbono (CO).
Área de la Ciencia:
- La bioquímica es la bioquímica.
- Enzimología Enzimología.
- Química bioorgánica Química bioorgánica.
Sus antecedentes:
- La deshidrogenasa de monóxido de carbono/acetil-CoA sintasa (CODH/ACS) facilita el crecimiento autotrófico en los microbios a través de la vía Wood-Ljundahl.
- El CO se canaliza hacia el sitio activo de la acetil-CoA sintasa (ACS) para la síntesis de acetil-CoA.
- El sitio activo de la ACS presenta un grupo [4Fe-4S] y un centro de níquel binuclear (sitios proximales y distales de Ni).
Objetivo del estudio:
- Para caracterizar la forma carbonilada del monómero ACS de *C. hidrogenoformans*.
- Para dilucidar las especies paramagnéticas predominantes formadas tras la reacción con el monóxido de carbono (CO).
Principales métodos:
- Expresión heterológica de *C. hydrogenoformans* ACS en *E. coli*.
- Espectroscopia de resonancia paramagnética de electrones (RFQ-EPR) de congelación rápida y apagado.
- Espectroscopia infrarroja de flujo detenido (SF-IR). espectroscopia infrarroja de flujo detenido (SF-IR).
Principales resultados:
- La reacción de ACS con CO forma una sola especie metal-carbonilo.
- La tasa de formación de esta especie, medida por SF-IR, se correlaciona con la tasa de formación de las especies paramagnéticas de NiFeC observadas por RFQ-EPR.
- La especie de NiFeC, la forma predominante en solución, contiene Ni proximal en el estado redox +1 y el grupo [4Fe-4S] en el estado 2+.
Conclusiones:
- La especie NiFeC es la forma predominante de ACS cuando reacciona con CO.
- No hay evidencia de estados de Ni(0) o Ni(II) en la forma carbonilada activa de la enzima.
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