Selección no SELEX de los aptameros

Área de la Ciencia:

• Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La selección de aptamer tradicionalmente utiliza la evolución sistemática de los ligandos por enriquecimiento exponencial (SELEX).
• SELEX implica particiones iterativas y pasos de amplificación de PCR, que consumen mucho tiempo y limitan las aplicaciones.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un método de selección de aptameros no SELEX.
• Demostrar la eficiencia y velocidad de este nuevo enfoque utilizando electroforesis capilar no de equilibrio de mezclas de equilibrio (NECEEM).

Principales métodos:

• Utilizado NECEEM para la partición de pasos sin la intervención de la amplificación de PCR.
• Empleó una estrategia no SELEX con particiones repetitivas NECEEM.
• Aplicó el método para seleccionar aptameros de ADN contra una proteína diana.

Principales resultados:

• Se logró una mejora de más de 4 órdenes de magnitud en la afinidad de la biblioteca de ADN con la proteína diana en solo tres pasos de partición NECEEM.
• La afinidad aptamérica resultante superó a la de tres rondas de SELEX. basado en NECEEM.
• Completó todo el proceso de selección en solo 1 hora, significativamente más rápido que el SELEX convencional.

Conclusiones:

• Se introdujo un método de selección de aptamer no SELEX extremadamente rápido, económico y eficiente.
• Demostró que los aptameros pueden ser más abundantes de lo que se pensaba anteriormente.
• Se abrieron nuevas vías para la selección de fármacos candidatos de bibliotecas de pequeñas moléculas inadecuadas para SELEX.