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In-vitro Mutagenesis01:16

In-vitro Mutagenesis

To learn more about the function of a gene, researchers can observe what happens when the gene is inactivated or “knocked out,” by creating genetically engineered knockout animals. Knockout mice have been particularly useful as models for human diseases such as cancer, Parkinson’s disease, and diabetes.
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Because the DNA segments are cut and reorganized in a direction-specific manner, site-specific recombination has emerged as an efficient genetic engineering technique. Flippase and Cyclization recombinases or Flp and Cre, respectively, are two members of the tyrosine recombinase family derived from bacteriophages, that are used to mediate site-specific DNA insertions, deletions, and targeted expression of proteins in mammalian cell lines.
The recognition sites for Cre recombinase called LoxP...
Mouse Models of Cancer Study02:43

Mouse Models of Cancer Study

Mice have long served as models for studying human biology and pathology because of their phylogenetic and physiological similarity with humans. They are also easy to maintain and breed in the laboratory, and hence, many inbred strains are now available for research. Studies on mice have contributed immeasurably to our understanding of cancer biology.
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Helen A C Wallace1, Fatima Marques-Kranc, Melville Richardson

  • 1Institute for Stem Cell Research, University of Edinburgh, King's Buildings, West Mains Road, Edinburgh EH9 3JQ, United Kingdom.

Cell
|January 16, 2007
PubMed
Resumen

La sustitución genómica mediada por recombinasa (RMGR) permite la edición del genoma del ratón a gran escala. Este método reemplazó con éxito el ADN del ratón con el ADN humano, creando modelos precisos para enfermedades genéticas como la alfa talasemia.

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Área de la Ciencia:

  • Genética La genética.
  • Ingeniería Genómica Ingeniería Genómica.
  • Tecnología transgénica Tecnología transgénica.

Sus antecedentes:

  • Las tecnologías transgénicas actuales tienen limitaciones para el estudio de grandes regiones genómicas.
  • El modelado preciso de enfermedades genéticas humanas en ratones es crucial para la investigación.

Objetivo del estudio:

  • Desarrollar una nueva estrategia para reemplazar grandes segmentos genómicos de ratón con regiones sintéticas humanas.
  • Para crear modelos avanzados de ratones para el estudio de la expresión génica humana y los trastornos genéticos.

Principales métodos:

  • Desarrolló la sustitución genómica mediada por recombinasa (RMGR) utilizando sitios de lox heterotípicos y Cre recombinase.
  • Células ES de ratón modificadas y BACs humanos para el intercambio genómico segmental.
  • Se generaron ratones homocigotos con dominios reguladores de alfa globina humana.

Principales resultados:

  • Se reemplazó con éxito un segmento genómico de ratón de >100 kb con su equivalente humano.
  • Creó ratones que producen sólo cadenas de alfa globina humana.
  • Desarrolló un modelo de ratón preciso para la talasemia alfa humana.

Conclusiones:

  • RMGR es una técnica factible y poderosa para el reemplazo genómico a gran escala.
  • Este método supera las limitaciones de los enfoques transgénicos actuales.
  • RMGR facilita el estudio de la expresión génica humana y el modelado de enfermedades genéticas.