REST mantiene la autorrenovación y la pluripotencia de las células madre embrionarias

Área de la Ciencia:

• Biología de las células madre Biología de las células madre
• La epigenética es la epigenética.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• Las células madre embrionarias de ratón (CEM) expresan altos niveles del represor neuronal REST (factor de transcripción silenciador de RE1).
• La función precisa de REST en la auto-renovación del CES y la pluripotencia sigue siendo incompletamente entendida.

Objetivo del estudio:

• Aclarar el papel de REST en el mantenimiento de la auto-renovación y la pluripotencia en el ratón ESCs.
• Investigar los mecanismos reguladores mediante los cuales REST influye en las decisiones de destino del CES.

Principales métodos:

• Análisis de los niveles de expresión de REST en la auto-renovación frente a la diferenciación de las ESC (cuerpos embrionarios).
• Manipulación genética de los niveles de REST (deleción heterocigótica, knockdown de siRNA, adición exógena) en los ESC de ratón y cuerpos embrionarios.
• Evaluación de marcadores de auto-renovación (Oct4, Nanog, Sox2, c-Myc) y marcadores específicos del linaje.
• Inmunoprecipitación de cromatina para identificar los sitios de unión REST en los genes de miRNA.
• Cuantificación de la expresión de miRNA, en particular miR-21.

Principales resultados:

• La expresión de REST es significativamente mayor en las ESC que se renuevan a sí mismas en comparación con los cuerpos embrionarios que se diferencian.
• La pérdida de la función REST en los ESC lleva a la pérdida de la auto-renovación y la inducción de múltiples marcadores de linaje.
• La adición exógena de REST rescata la autorrenovación en las células que se diferencian y mantiene los marcadores de pluripotencia.
• REST se une directamente a la cromatina de miRNAs, incluido miR-21, que se dirigen a los reguladores de auto-renovación.
• miR-21 suprime la auto-renovación del ESC mediante la regulación a la baja de Oct4, Nanog, Sox2 y c-Myc.

Conclusiones:

• REST es un factor crítico para mantener la auto-renovación del ESC del ratón y la pluripotencia.
• REST ejerce su función en parte a través de la supresión de miR-21, un regulador negativo clave de los genes de pluripotencia.
• REST es un componente integral de la red reguladora que rige el destino del CES.