Aplicación de la colección de quinomas activos y deficientes en quinasa para la identificación de las quinasas que regulan la señalización del erizo

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La señalización celular.
• La genómica es la genómica.

Sus antecedentes:

• Comprender las vías de señalización celular es crucial para identificar los mecanismos de la enfermedad.
• Las proteína quinasas juegan un papel central en la transducción de señales, pero requieren un estudio sistemático.
• Faltaba un recurso completo para el estudio de la función de la quinasa.

Objetivo del estudio:

• Para crear un recurso a escala de genoma de las proteínas quinasas humanas y sus mutantes.
• Establecer y validar el cribado de la expresión del quinoma para identificar reguladores de la señalización.
• Descubrir nuevos componentes y la interconexión en las vías de señalización celular.

Principales métodos:

• Clonó más del 90% de los cDNA de la proteína quinasa humana de longitud completa.
• Mutantes construidos con actividad de la quinasa deficiente. mutantes construidos con actividad de la quinasa deficiente.
• Ejecutó pantallas de expresión del quinoma en tres modelos de señalización celular, incluida una pantalla de vía de señalización de mamíferos Hedgehog (Hh).

Principales resultados:

• Se identificaron numerosas quinasas con efectos modestos, lo que indica un cruce de vías.
• Descubrieron nuevos reguladores, incluidos MAP3K10 y DYRK2, en la pantalla de señalización Hh.
• Se ha demostrado que DYRK2 fosforila y degrada directamente el factor de transcripción GLI2; MAP3K10 modula la actividad de DYRK2 y GSK3beta.

Conclusiones:

• La detección de la expresión del kinoma es una herramienta poderosa para identificar genes en la señalización fisiológica y patológica.
• El recurso de quinasa desarrollado permite estudios funcionales a escala genómica.
• Reveló interacciones específicas de la quinasa y mecanismos reguladores dentro de la vía Hh.