Videos de Experimentos Relacionados
Expresión clonación de ADNc del receptor KGF mediante la creación de un bucle autocrino transformador
T Miki1, T P Fleming, D P Bottaro
1Laboratory of Cellular and Molecular Biology, National Cancer Institute, Bethesda, MD 20892.
Science (New York, N.Y.)
|January 4, 1991
Resumen
Los investigadores aislaron el cDNA del receptor del factor de crecimiento de queratinocitos (KGF) utilizando clonación de expresión. Este método identificó un nuevo receptor de tirosina quinasa con alta afinidad para KGF y FGF ácido, aplicable a otras vías de señalización.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- La señalización celular de las células.
- El receptor de las tirosina-cinasas de los receptores.
Sus antecedentes:
- El factor de crecimiento de los queratinocitos (KGF) es un mitógeno específico de las células epiteliales.
- La identificación del receptor KGF es crucial para comprender la regulación del crecimiento de las células epiteliales.
- Los factores de crecimiento de los fibroblastos (FGF) juegan un papel importante en la proliferación y diferenciación celular.
Objetivo del estudio:
- Diseñar una estrategia de clonación de expresión para aislar el ADN complementario (ADNc) para el receptor KGF.
- Caracterizar las propiedades de unión y la naturaleza molecular del receptor KGF aislado.
Principales métodos:
- Transfección de los fibroblastos NIH / 3T3 con una expresión de queratinocitos biblioteca de ADNc.
- Selección de focos transformados basados en la unión específica de KGF de alta afinidad.
- Análisis de la competencia vinculante con los factores de crecimiento de los fibroblastos (FGF) relacionados.
- Rescate y secuenciación del ADNc de 4,2 kilobases que codifica el receptor.
Principales resultados:
- Aislamiento exitoso de un cDNA de 4,2 kilobases que codifica el receptor KGF.
- El receptor exhibe una unión de alta afinidad tanto para el KGF como para el FGF ácido.
- La proteína codificada es una tirosina quinasa que atraviesa la membrana, relacionada pero distinta del receptor básico del FGF.
- Demostró la utilidad de la clonación de expresión para aislar genes de vías de señalización.
Conclusiones:
- La estrategia de clonación de expresión es efectiva para aislar los cDNAs del receptor del factor de crecimiento.
- El receptor KGF identificado es una nueva tirosina quinasa con una amplia especificidad de unión al FGF.
- Este enfoque puede aplicarse ampliamente para identificar genes en los pasos limitantes de las vías de señalización mitogénica.