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Labeling DNA Probes03:31

Labeling DNA Probes

DNA probes are fragments of DNA labeled with a reporter tag to enable their detection or purification. The resulting labeled DNA probes can then hybridize to target nucleic acid sequences through complementary base-pairing, and may be used to recover or identify these regions.
Radioisotopes, fluorophores, or small molecule binding partners like biotin or digoxigenin, are the most widely used reporter tags for labeling DNA probes. These labels can be attached to the probe DNA molecule via...

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La sonda de conmutación Aptamer se basa en el desplazamiento intramolecular.

Zhiwen Tang1, Prabodhika Mallikaratchy, Ronghua Yang

  • 1Center for Research at the Bio/Nano Interface, Department of Chemistry, Shands Cancer Center and UF Genetics Institute, University of Florida, Gainesville, Florida 32611-7200, USA.

Journal of the American Chemical Society
|August 6, 2008
PubMed
Resumen
Este resumen es generado por máquina.

Una nueva sonda con interruptor de aptamer (ASP) utiliza la transducción de señales intramoleculares para la detección molecular sensible. Este diseño de sonda molecular basado en aptamer ofrece fluorescencia mejorada para la identificación de objetivos, mostrando un gran potencial para aplicaciones de bioimagen.

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Área de la Ciencia:

  • Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.
  • Biología Molecular Biología Molecular
  • Química analítica Química analítica es la que

Sus antecedentes:

  • Las sondas basadas en Aptamer son cruciales para la detección molecular.
  • La transducción de señales intramoleculares ofrece un mecanismo de detección sensible.

Objetivo del estudio:

  • Para demostrar un nuevo diseño de sonda molecular basado en aptamer utilizando la transducción de señal intramolecular.
  • Diseñar y validar una sonda de interruptor de aptamer (ASP) para la detección de objetivos sensibles y selectivos.

Principales métodos:

  • Diseñó una sonda de conmutación de aptamer (ASP) con un aptamer, cDNA, PEG linker, fluoróforo y apagador.
  • ASP diseñados para ATP y objetivos de alfa-trombina humana.
  • Cambios de fluorescencia investigados tras la unión del objetivo a través de la transducción de la señal intramolecular.

Principales resultados:

  • El diseño de ASP mostró una mejora de la fluorescencia al unirse a la molécula objetivo.
  • Cambios cuantitativos demostrados de fluorescencia mediados por diferentes concentraciones objetivo.
  • Logró una excelente selectividad y respuesta rápida tanto para el ATP como para los objetivos de alfa-trombina humana.

Conclusiones:

  • El diseño de la sonda con interruptor de aptamer (ASP) permite una transducción de señal intramolecular eficiente para la detección molecular.
  • Los ASP exhiben un potencial prometedor para aplicaciones en biochips e imágenes in situ debido a su sensibilidad, estabilidad y reutilización.