La clonación de ADN complementario que codifica un receptor humano de interleucina-8 funcional.

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología celular Biología celular.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• La interleucina-8 (IL-8) es una citocina inflamatoria clave.
• La IL-8 media en las funciones de los neutrófilos como la quimiotaxis y el estallido respiratorio.
• Los receptores neutrófilos de IL-8 están acoplados a proteínas G y desencadenan la liberación de calcio intracelular.

Objetivo del estudio:

• Para aislar y caracterizar un clon de ADNc codificando un receptor IL-8 humano.
• Para confirmar la expresión funcional del receptor IL-8 identificado.

Principales métodos:

• clonación de ADNc de los neutrófilos HL-60.
• Expresión del clon (p2) en óvulos de Xenopus laevis.
• Ensayos de unión con 125I-etiquetado IL-8.
• Medición de la movilización de calcio en respuesta a la IL-8.

Principales resultados:

• Se aisló un clon de ADNc, p2, que codifica un receptor IL-8 humano.
• Los ovocitos de Xenopus que expresan p2 están específicamente unidos 125I-IL-8.
• La IL-8 indujo la movilización de las reservas de calcio en los ovocitos en expresión con un EC50 de 20 nM.
• El receptor p2 mostró un 77% de identidad de aminoácidos con otro isotipo de receptor IL-8 humano y un 69% con un receptor de péptido N-formil de conejo.

Conclusiones:

• El clon p2 representa un receptor IL-8 humano funcional.
• Este receptor juega un papel en las respuestas inflamatorias de los neutrófilos.
• Los hallazgos proporcionan información sobre la diversidad y función de los receptores acoplados a proteínas G.