El microarray de acetilación de proteínas revela que NuA4 controla el objetivo metabólico clave que regula la...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Biología celular Biología celular.

Sus antecedentes:

• Las histonas acetiltransferasas (HAT) y las histonas desacetilasas (HDAC) regulan las funciones celulares críticas a través de sustratos no histónicos en metazoos.
• En Saccharomyces cerevisiae, solo se conocían previamente sustratos no histónicos asociados a la cromatina.
• La nucleosoma esencial acetiltransferasa del complejo H4 (NuA4) juega un papel clave en la regulación celular.

Objetivo del estudio:

• Para identificar y caracterizar los sustratos no cromatínicos del complejo NuA4 en la levadura.
• Para investigar el papel de la acetilación de Pck1p en el metabolismo de la glucosa y la vida útil celular.
• Explorar la conservación evolutiva de la regulación de Pck1p por las HAT/HDAC.

Principales métodos:

• Microarrays de proteoma de levadura para la identificación de sustratos.
• Espectrometría de masas en tándem para la determinación de sitios de acetilación.
• Pruebas enzimáticas in vitro e in vivo. ensayos enzimáticos in vitro e in vivo. ensayos enzimáticos en vivo. ensayos enzimáticos in vitro y in vivo. ensayos enzimáticos in vivo. ensayos enzimáticos in vitro y in vivo. ensayos enzimáticos in vivo. ensayos enzimáticos in vitro y in vivo. ensayos enzimáticos in vivo.
• Análisis de la vida útil cronológica de la levadura y la producción de glucosa en las células humanas.

Principales resultados:

• Se identificaron numerosos sustratos no cromatínicos para el complejo NuA4.
• Determinados sitios de acetilación (Lys19 y 514) en la carboxicinaza del fosfenol piruvato (Pck1p).
• La acetilación en Lys514 es esencial para la actividad enzimática de Pck1p y el crecimiento de la levadura en fuentes de carbono no fermentables.
• Sir2p desacetilado Pck1p tanto in vitro como in vivo.
• La pérdida de actividad de Pck1p deterioró la extensión de la vida útil bajo hambre de agua.
• La acetilación humana de Pck1 y la producción de glucosa en las células HepG2 dependen del TIP60 (homólogo de ESA1).

Conclusiones:

• El complejo NuA4 regula el metabolismo de la glucosa y la esperanza de vida a través de la acetilación de la enzima metabólica Pck1p.
• La acetilación de Pck1p es un mecanismo regulador conservado que afecta la fisiología celular y la vida útil.
• Este estudio revela un nuevo vínculo entre las histonas acetiltransferasas, las enzimas metabólicas y el envejecimiento.