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El producto del gen vsr de E. coli K-12 es una endonucleasa de desajuste de ADN específica de cadena y secuencia
F Hennecke1, H Kolmar, K Bründl
1Institut für Molekulare Genetik, Georg-August-Universität Göttingen, Germany.
Nature
|October 24, 1991
Resumen
La vía de reparación del VSP corrige los desajustes de ADN causados por la metilación de la citosina en E. coli. La endonucleasa Vsr inicia esta reparación cortando secuencias específicas de ADN en el sitio de desajuste.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Mecanismos de reparación del ADN.
- Enzimología Enzimología.
Sus antecedentes:
- Escherichia coli K-12 Dcm metiltransferasa metila la citosina en las secuencias CCA/TGG.
- La desaminación de la 5-metilcitosina crea timina, lo que lleva a desajustes T / G, una lesión pre-mutagénica.
- La vía de reparación VSP (parche muy corto) corrige estos desajustes T / G, que involucran genes vsr, polA, mutL y mutS.
Objetivo del estudio:
- Para caracterizar el producto del gen Vsr como un desajuste de ADN endonuclease.
- Aclarar el papel de la endonucleasa Vsr en el inicio de la reparación de desajuste de VSP.
Principales métodos:
- Purificación y caracterización del producto del gen Vsr.
- Ensayos in vitro para determinar la actividad de nicking de la endonucleasa Vsr en sustratos de ADN no coincidentes.
Principales resultados:
- La proteína Vsr (Mr 18,000) funciona como una endonucleasa de desajuste de ADN.
- La endonucleasa Vsr corta específicamente el ADN de doble cadena en las secuencias CTA/TGN o NTA/TGG adyacentes a una falta de coincidencia timidina-guanosina.
- La actividad de nicking depende de la presencia de un desajuste y es específica de la hebra.
Conclusiones:
- La endonucleasa Vsr es una enzima novedosa que inicia la vía de reparación de desajuste de VSP.
- El cortado específico de la cadena por la endonucleasa Vsr es crucial para dirigir la reparación a la cadena de ADN correcta.