La inhibición de las proteínas del dominio de la prolyl hidroxilasa promueve la revascularización terapéutica

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Biología Vascular Biología Vascular
• Investigación de la investigación de la isquemia.

Sus antecedentes:

• Las subunidades del factor inducible a la hipoxia (HIF, por sus siglas en inglés) están reguladas por las proteínas del dominio de la prolyl hidroxilasa dependientes del oxígeno (PHD, por sus siglas en inglés).
• Los PHD (PHD1, PHD2, PHD3) tienen como objetivo el HIF para la degradación.
• Investigando la inhibición de la PHD para regular el HIF para promover la neovascularización posisquémica.

Objetivo del estudio:

• Para determinar si la inhibición de las PHD a través de la regulación al alza de HIF promueve la neovascularización posisquémica.
• Evaluar el papel de las isoformas específicas de PHD (PHD1, PHD2, PHD3) en este proceso.
• Para confirmar la necesidad de la señalización HIF-1 en la mediación de los efectos proangiogénicos.

Principales métodos:

• Los ratones se sometieron a ligadura de la arteria femoral derecha.
• La electrotransferencia in vivo de los ARN de horquilla corta (shRNAs) dirigidos al HIF-1alfa, PHD1, PHD2 o PHD3.
• El grupo de control recibió shRNA irrelevante (shCON).
• Análisis de los niveles de ARNm y proteínas de los PHD, HIF-1alfa, VEGF-A, eNOS, MCP-1 y la infiltración de los macrófagos.
• Evaluación de la neovascularización y la perfusión del pie.

Principales resultados:

• El silenciamiento de los PHD (especialmente PHD2 y PHD3) transitoriamente regulado a la baja el PHD mRNA / proteína y regulado al alza HIF-1alpha.
• La upregulación de los factores proangiogénicos (VEGF-A, eNOS) y una mayor infiltración de los macrófagos (con shPHD2/shPHD3).
• Aumentos significativos en la densidad de los vasos, la densidad capilar y la perfusión del pie en ratones tratados con shPHD2 y shPHD3.
• La administración concomitante de shHIF-1alpha abrogó los efectos de shPHD3, confirmando la dependencia de HIF-1.

Conclusiones:

• La inhibición directa de las PHD, en particular la PHD3, promueve la revascularización terapéutica.
• La vía de señalización HIF-1 es esencial para mediar los efectos proangiogénicos del silenciamiento de la PHD.
• Dirigirse a los PHD representa una estrategia potencial para el tratamiento de afecciones isquémicas.