La heterocromatina sintética evita el RNAi y las repeticiones centroméricas para establecer centrómeros funcionales

Área de la Ciencia:

• La epigenética es la epigenética.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Biología de la cromatina Biología de la cromatina

Sus antecedentes:

• Los centrómeros de la levadura de fisión ensamblan kinetocores en los nucleosomas CENP-A ((Cnp1).
• La formación de la heterocromatina, guiada por la interferencia del ARN (RNAi) y la histona H3 lisina 9 metiltransferasa Clr4, es crucial para el establecimiento de la cromatina CENP-A(Cnp1).

Objetivo del estudio:

• Investigar si la formación de heterocromatina por sí sola es suficiente para el establecimiento de centrómeros.
• Determinar el papel de las repeticiones externas y el RNAi en la dirección de la formación de heterocromatina.

Principales métodos:

• Atar Clr4 a los loci eucromáticos utilizando sitios de unión al ADN para inducir la heterocromatina sintética.
• Evaluar de novo el ensamblaje de CENP-A ((Cnp1) y kinetochore en minicromosomas basados en plásmidos.
• Evaluación de la segregación mitótica con y sin ARNi activo.

Principales resultados:

• El Clr4 atado indujo con éxito el ensamblaje de la heterocromatina, independiente del ARN i activo.
• La heterocromatina sintética sustituye a las repeticiones externas, permitiendo de novo el ensamblaje de CENP-A ((Cnp1) y el kinetocore.
• Los centrómeros funcionales y la segregación mitótica se lograron incluso cuando el RNAi estaba inactivo.

Conclusiones:

• Las repeticiones externas son principalmente sustratos de RNAi para dirigir la formación de heterocromatina.
• La heterocromatina dependiente de la metilación H3K9 es suficiente para establecer centrómeros y cinetocores funcionales.
• El establecimiento de centrómeros puede lograrse independientemente de la vía canónica del ARNi.