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Updated: May 12, 2026

A Protocol for Multiple Gene Knockout in Mouse Small Intestinal Organoids Using a CRISPR-concatemer
Published on: July 12, 2017
La programación de células mediante la ingeniería del genoma múltiple y la evolución acelerada.
Harris H Wang1,2,3, Farren J Isaacs1, Peter A Carr4,5
1Department of Genetics, Harvard Medical School, Boston, Massachusetts 02115, USA.
La ingeniería genómica automatizada multiplex (MAGE) crea rápidamente una gran diversidad genómica en las células. Esta tecnología acelera la evolución de los organismos para mejorar las aplicaciones industriales, como la mejora de la producción de licopeno.
Área de la Ciencia:
- Biología sintética Biología sintética.
- La genómica es la genómica.
- Ingeniería Metabólica Ingeniería Metabólica.
Sus antecedentes:
- La generación de diversidad genómica en el laboratorio es un desafío para las escalas de tiempo prácticas.
- Los métodos de evolución dirigida existentes son laboriosos y se limitan a la manipulación de un solo gen.
- Existe la necesidad de una evolución paralela y continua de las redes de genes y los genomas.
Objetivo del estudio:
- Describir la ingeniería del genoma automatizado múltiple (MAGE) para la programación y evolución celular a gran escala.
- Desarrollar dispositivos automatizados para la generación rápida y continua de diversos cambios genéticos.
- Para optimizar la vía de biosíntesis de DXP para la sobreproducción de licopeno.
Principales métodos:
- MAGE se dirige simultáneamente a múltiples ubicaciones genómicas dentro de una sola célula o población.
- Los dispositivos MAGE automatizados facilitan la generación cíclica y escalable de diversidad genómica combinatoria.
- Modificación simultánea de 24 componentes genéticos en la vía DXP utilizando pools de ADN sintético.
Principales resultados:
- Se generan más de 4,3 mil millones de variantes genómicas combinatorias al día.
- Logró un aumento de cinco veces en la producción de licopeno en 3 días.
- Demostró una mejora significativa con respecto a las técnicas de ingeniería metabólica existentes.
Conclusiones:
- MAGE permite una rápida ingeniería a gran escala y la evolución de las células.
- Este enfoque múltiple acelera el diseño y la evolución de organismos con nuevas propiedades.
- MAGE es una poderosa herramienta para optimizar las vías metabólicas para aplicaciones industriales.

