La quinasa Dbf4-Cdc7 promueve la fase S al aliviar una actividad inhibidora en Mcm4

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La replicación del ADN de los eucariotas está estrictamente regulada por vías de la cinasa, incluyendo las cinasas proteicas dependientes de la ciclina específicas de la fase S (S-CDKs) y la cinasa Dbf4-Cdc7 (DDK).
• Si bien se conocen las funciones de la S-CDK en la iniciación de la replicación del ADN, el mecanismo preciso de la DDK sigue sin estar claro.

Objetivo del estudio:

• Para aclarar la función de la Dbf4-Cdc7 quinasa (DDK) en la replicación del ADN de los eucariotas.
• Para investigar el papel del dominio rico en serina/treonina (DNS) del Mcm4 N-terminal en el control de la replicación del ADN.

Principales métodos:

• Utilizado Saccharomyces cerevisiae como un organismo modelo.
• Empleó mutantes mcm4 que carecen de actividad inhibidora y mutaciones que eluden los requisitos de CDK para el inicio de la replicación.
• Evaluó la síntesis del ADN, la progresión de la fase S y la activación del punto de control intra-S en varias condiciones, incluido el daño al ADN inducido por la hidroxiurea.

Principales resultados:

• Se identificaron funciones inhibidoras y facilitadoras para el dominio rico en serina/treonina (DNS) N-terminal de Mcm4.
• Se demostró que la función esencial del DDK es aliviar la inhibición por el Mcm4 NSD.
• Se demostró que la síntesis de ADN puede ocurrir en la fase G1 sin CDK y DDK, pero el DDK es crucial para una progresión eficiente de la fase S.
• Se observó que las células DDK-null no activan el punto de control intra-S-fase y son sensibles al daño del ADN.

Conclusiones:

• El NSD Mcm4 específico de los eucariotas integra múltiples señales reguladoras de la proteína quinasa para la progresión de la fase S.
• DDK actúa aliviando una actividad inhibidora dentro de la Mcm4 NSD, esencial para la progresión de la fase S y la respuesta al daño del ADN.