Represión de la transcripción del VIH-1 por una proteína celular

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• El promotor del virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) contiene elementos reguladores que controlan la transcripción viral.
• Los factores celulares juegan un papel crítico en la modulación de la expresión génica viral y la patogénesis.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el papel de la proteína de unión al ADN celular LBP-1 en la regulación de la transcripción del VIH-1.
• Para aclarar el mecanismo por el cual LBP-1 interactúa con el promotor del VIH-1.

Principales métodos:

• Ensayos de transcripción in vitro utilizando LBP-1 purificado y ADN promotor.
• Ensayos de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA) para estudiar las interacciones proteína-ADN.
• Mutagénesis dirigida al sitio de los sitios de unión a LBP-1 dentro del promotor del VIH-1.
• Análisis de la transcripción del VIH-1 en líneas celulares establemente transformadas.

Principales resultados:

• LBP-1 se une a dos sitios que flanquean el sitio de inicio transcripcional del VIH-1 de una manera dependiente de la concentración.
• El LBP-1 purificado reprime la transcripción del VIH-1 in vitro al unirse a un sitio aguas arriba (sitio II) que se solapa con el elemento TATA.
• La represión depende de la unión de LBP-1 al sitio II y puede ser bloqueada por el factor de unión TATA (TFIID).
• Las mutaciones que interrumpen la unión de LBP-1 al sitio II eliminan la represión in vitro y mejoran la transcripción del VIH-1 en las células.

Conclusiones:

• LBP-1 actúa como un represor de la transcripción del VIH-1 a través de la interacción con el sitio II, inhibiendo potencialmente la unión de TFIID.
• Este mecanismo de regulación celular se asemeja a la actividad represora bacteriana y puede contribuir a la latencia del VIH-1.