Aislamiento de un cDNA humano relacionado con rel que potencialmente codifica la subunidad 65-kD de NF-kappa B
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S M Ruben1, P J Dillon, R Schreck
1Department of Molecular Oncology and Virology, Roche Institute of Molecular Biology, Roche Research Center, Nutley, NJ 07110-1199.
Science (New York, N.Y.)
|March 22, 1991
Resumen
Los investigadores identificaron una nueva proteína de 65 kilodaltones en los linfocitos humanos. Esta proteína, relacionada con el proto-oncogén c-rel, puede ser la subunidad p65 del complejo activo del factor de transcripción del factor nuclear kappa B (NF-kappa B).
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Inmunología Inmunología.
- Genética La genética.
Sus antecedentes:
- El proto-oncogén c-rel, Drosophila dorsal y la subunidad NF-kappa B p50 comparten dominios conservados.
- NF-kappa B es un factor de transcripción crucial en las respuestas inmunes.
Objetivo del estudio:
- Identificar y caracterizar nuevas proteínas de la familia rel involucradas en la señalización de NF-kappa B.
- Investigar el papel de una proteína relacionada con el rel recientemente identificada en los linfocitos T y B.
Principales métodos:
- La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y los oligonucleótidos degenerados se utilizaron para generar una sonda de ADN.
- La hibridación del ADN complementario (ADNc) identificó un ARN mensajero de 2,6 kilobases (ARNm) en los linfocitos.
- La transcripción y la traducción in vitro produjeron una proteína de 65 kilodaltones (kD) para el análisis funcional.
Principales resultados:
- La proteína de 65 kD exhibió una débil unión al ADN específica para el motivo kappa B.
- La unión fue inhibida por las proteínas I kappa B-alfa y -beta, similares a la subunidad p65 NF-kappa B.
- La proteína de 65 kD asociada con la subunidad NF-kappa B p50, formando un complejo con movilidad electroforética idéntica al complejo NF-kappa B-ADN.
Conclusiones:
- La proteína relacionada con rel de 65kD identificada es probablemente la subunidad p65 del factor de transcripción activo NF-kappa B.
- Este hallazgo contribuye a la comprensión de la composición y regulación del complejo NF-kappa B.