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Decodificación de los ácidos nucleicos circulantes en el suero humano utilizando espectroscopia microfluídica de

Kelvin J Liu1, Malcolm V Brock, Ie-Ming Shih

  • 1Biomedical Engineering Department, 3400 North Charles Street, Johns Hopkins University, Baltimore, Maryland 21218, USA.

Journal of the American Chemical Society
|April 7, 2010
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Este estudio introduce un nuevo ensayo de un solo paso para analizar el tamaño y la cantidad de ácido nucleico circulante (CNA) en el suero humano. La técnica microfluídica ofrece una alternativa rápida y barata a la PCR para el análisis de CNA.

Área de la Ciencia:

  • La bioquímica es la bioquímica.
  • Biología Molecular Biología Molecular
  • Química Analítica La Química Analítica es la

Sus antecedentes:

  • Los ácidos nucleicos circulantes (CNA) son valiosos biomarcadores no invasivos.
  • El tamaño del fragmento de ADN es un marcador prometedor para el cáncer y el diagnóstico prenatal.
  • Los métodos actuales de análisis CNA a menudo requieren procedimientos complejos como la PCR.

Objetivo del estudio:

  • Desarrollar un ensayo rápido, fácil y barato de un solo paso para analizar el tamaño y la cantidad de ADN circulante directamente en el suero humano.
  • Para demostrar la utilidad de la espectroscopia microfluídica de molécula única para el análisis de CNA.

Principales métodos:

  • Desarrolló un ensayo de un solo paso utilizando espectroscopia confocal de iluminación cilíndrica microfluídica.

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  • Empleó análisis de tamaño de ráfagas de fluorescencia para contar y dimensionar individualmente las moléculas de CNA etiquetadas con fluorescencia.
  • Se estableció una curva de calibración de tamaño utilizando el ADN de digestión lambda Hind III (564 bp a 27.5 kbp).

    • Principales resultados:

    • Se logró una relación lineal entre la longitud del ADN y el tamaño de la ráfaga de 564 bp a 27.5 kbp.
    • Parámetros optimizados de ensayo de molécula única para muestras de suero.
    • Se realizó con éxito el análisis del tamaño del ADN directamente en el suero del paciente sin aislamiento o amplificación del ADN.

    Conclusiones:

    • La espectroscopia microfluídica de molécula única proporciona una alternativa rápida, fácil y barata al análisis de CNA basado en PCR.
    • Este ensayo permite el análisis directo del tamaño y la cantidad de ADN circulante en el suero humano.
    • El método desarrollado tiene potencial para mejorar el cáncer y el diagnóstico prenatal.