La clonación y la expresión de un ADN complementario que codifica un receptor bovino adrenal de angiotensina II tipo...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.
• Farmacología Farmacología.

Sus antecedentes:

• La angiotensina II regula el transporte cardiovascular, neuronal y de electrolitos.
• Los intentos anteriores de aislar el receptor de angiotensina II fracasaron debido a la inestabilidad y las bajas concentraciones.

Objetivo del estudio:

• Para superar las dificultades en la purificación del receptor de la angiotensina II.
• Para identificar y caracterizar el receptor de la angiotensina II bovina.

Principales métodos:

• La clonación de expresión de un ADN complementario (ADNc) que codifica el receptor de la angiotensina II bovina.
• Transfección de las células COS-7 con el receptor cDNA.
• Ensayos de unión de ligandos y mediciones intracelulares de calcio/inositol trifosfato.
• Análisis de la mancha del norte para determinar la expresión del ARN mensajero.

Principales resultados:

• El ADNc clonado codifica una proteína de 359 aminoácidos con una topología de receptores acoplados a proteínas G.
• Las células transfectadas exhibieron una unión específica de alta afinidad para la angiotensina II y los antagonistas.
• La estimulación de la angiotensina II/III aumentó el Ca2+ intracelular y el inositol-1,4,5-trisfosfato.
• El receptor se identifica como el receptor de angiotensina II tipo 1.
• Expresión de ARN mensajero detectada en la glándula suprarrenal y el riñón bovinos.

Conclusiones:

• Expresión exitosa de la clonación del receptor bovino de angiotensina II tipo 1.
• El receptor clonado media las vías clave de señalización de la angiotensina II.
• Esto proporciona una nueva vía para estudiar la función y la regulación del receptor de angiotensina II.