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Updated: May 8, 2026

Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells
Published on: June 16, 2017
El sistema inmunológico bacteriano CRISPR / Cas divide el bacteriófago y el ADN del plásmido
Josiane E Garneau1, Marie-Ève Dupuis, Manuela Villion
1Département de biochimie, de microbiologie et de bio-informatique, Faculté des sciences et de génie, Groupe de recherche en écologie buccale, Faculté de médecine dentaire, Félix d'Hérelle Reference Center for Bacterial Viruses, Université Laval, Quebec City, Quebec G1V 0A6, Canada.
El sistema CRISPR1/Cas de Streptococcus thermophilus puede adquirir espaciadores de los plásmidos, lo que lleva a la pérdida de plásmidos y proporciona inmunidad contra los genes de resistencia a los antibióticos. Este sistema inmunológico bacteriano divide rápidamente el ADN invasor.
Área de la Ciencia:
- Microbiología Microbiología.
- Biología Molecular Biología Molecular
- Genética La genética.
Sus antecedentes:
- Las bacterias y las arqueas poseen mecanismos de defensa contra los ácidos nucleicos extraños.
- El sistema de repeticiones palindrómicas cortas agrupadas regularmente espaciadas (CRISPR) / asociadas a CRISPR (Cas) proporciona inmunidad específica de la secuencia.
- Los sistemas CRISPR adquieren espaciadores de ADN extraño para reconocer y neutralizar invasiones posteriores.
Objetivo del estudio:
- Para investigar si el sistema CRISPR1/Cas de Streptococcus thermophilus puede adquirir espaciadores de plásmidos autorreplicantes.
- Determinar el papel de los espaciadores adquiridos en la pérdida de plásmidos y la inmunidad bacteriana.
- Proporcionar pruebas in vivo para el mecanismo de escisión del ADN del sistema CRISPR1/Cas.
Principales métodos:
- Adquisición experimental de espaciadores de plásmidos que contienen genes de resistencia a los antibióticos por el sistema CRISPR1/Cas.
- Observación de la pérdida de plásmidos en bacterias que contienen espaciadores adquiridos.
- Análisis in vivo de la actividad de escisión del ADN del sistema CRISPR1/Cas en el ADN del plásmido y del bacteriófago.
Principales resultados:
- El sistema Streptococcus thermophilus CRISPR1/Cas adquirió espaciadores de un plásmido autorreplicante, lo que resultó en la pérdida de plásmido.
- Los espaciadores adquiridos dirigidos a los genes de resistencia a los antibióticos conferían inmunidad contra la absorción y diseminación de plásmidos.
- Los estudios in vivo confirmaron la escisión específica del ADN de doble hebra del plásmido y el bacteriófago por el sistema CRISPR1/Cas en los sitios del proto-espaciador.
Conclusiones:
- El sistema inmune CRISPR/Cas es adaptable y puede dirigirse a los plásmidos autorreplicantes, no sólo a los genomas virales.
- Este mecanismo de selección natural impide la captación y propagación de genes de resistencia a los antibióticos.
- La eficiente capacidad de escisión del ADN del sistema CRISPR/Cas ofrece potencial para el desarrollo de cepas microbianas más seguras.
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