Las imágenes de una sola molécula revelan los mecanismos de la interrupción de las proteínas por una translocasa de...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología Estructural Biología estructural.

Sus antecedentes:

• Las translocaciones del ácido nucleico funcionan in vivo en el ADN y el ARN unidos a las proteínas.
• Un papel clave de las translocasas es catalizar el desplazamiento de proteínas de los ácidos nucleicos.
• Los mecanismos de expulsión de proteínas del ADN por las translocaciones siguen siendo en gran parte inexplorados.

Objetivo del estudio:

• Para dilucidar la base mecanicista del desplazamiento de proteínas desde el ADN.
• Para investigar las interacciones entre la translocación del ADN RecBCD y varias proteínas unidas al ADN.

Principales métodos:

• Utilizó cortinas de ADN nanofabricadas y microscopía multicolor de una sola molécula.
• Visualización de colisiones en tiempo real entre RecBCD y diferentes proteínas unidas al ADN.

Principales resultados:

• Se ha demostrado que RecBCD interrumpe varios obstáculos de proteínas, incluida la ARN polimerasa, el represor lac y los nucleosomas.
• RecBCD empujó activamente las proteínas miles de pares de bases antes del desalojo, sin pausa.
• La interrupción observada se produjo independientemente de la orientación de la proteína en relación con RecBCD.

Conclusiones:

• RecBCD supera los obstáculos ligados al ADN a través de la transducción de fuerza quimiomecánica directa.
• El desalojo de proteínas se produce a través de mecanismos de interrupción activa que actúan sobre los intermediarios del estado de transición.
• No se requieren interacciones específicas proteína-proteína para el desplazamiento mediado por RecBCD.