CENP-B preserva la integridad del genoma en las bifurcaciones de replicación detenidas por el retrotransposón LTR

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• La epigenética es la epigenética.

Sus antecedentes:

• La proteína B de unión al centromero (CENP-B) es un factor de unión al ADN conservado vinculado a la heterocromatina y las repeticiones centroméricas.
• Los homólogos de CENP-B en la levadura de fisión silencian las retrotransposones LTR a través de las histonas desacetilasas.
• Se han observado funciones inexplicables de CENP-B en la replicación del ADN.

Objetivo del estudio:

• Para dilucidar la función molecular de CENP-B en la replicación del ADN.
• Investigar el papel de CENP-B en la progresión de la bifurcación de replicación a través de retrotransposones LTR.
• Comprender los mecanismos que subyacen a la inestabilidad genómica en los mutantes del CENP-B.

Principales métodos:

• Análisis de la función de CENP-B en la replicación del ADN utilizando modelos de levadura de fisión.
• Investigación de la dinámica de la réplica y el bloqueo en las secuencias LTR.
• Evaluación de la inestabilidad genómica y los reordenamientos del ADN en mutantes del CENP-B.
• Estudio de la interacción entre CENP-B, LTR y el factor de unión al ADN Sap1.1.

Principales resultados:

• CENP-B promueve activamente la progresión de la bifurcación de replicación a través de las secuencias LTR.
• Los mutantes que carecen de CENP-B exhiben una mayor inestabilidad genómica debido al bloqueo de la bifurcación de replicación.
• El bloqueo de la bifurcación de replicación depende de la proteína de activación del interruptor 1 (Sap1) reclutada por los LTR.
• La pérdida de la actividad de la barrera mediada por Sap1 conduce a la progresión de la bifurcación sin obstáculos, pero causa reorganizaciones de retrotransposón perjudiciales.

Conclusiones:

• CENP-B contrarresta el bloqueo de la bifurcación de replicación mediada por LTR, promoviendo la estabilidad de la bifurcación.
• Las retrotransposones influyen en la polaridad de replicación reclutando Sap1 cerca de los bloques de la horquilla de replicación.
• Los hallazgos pueden explicar el papel de los LTR en sitios frágiles y la asociación de CENP-B con la heterocromatina pericentromérica.