Trans-activación por el VIH-1 Tat a través de una proteína de unión al ARN heterólogo

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La proteína Tat trans-activadora del virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) es crucial para la expresión y replicación de genes virales.
• Tat interactúa con una estructura específica de ARN, el bucle troncal TAR (respuesta de transactivación), ubicado en el extremo 5' de las transcripciones virales.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el mecanismo de acción de la proteína Tat del VIH-1.
• Para mapear los dominios funcionales de Tat.
• Para determinar si la función de transactivación de Tat depende del ARN TAR u otras proteínas de unión.

Principales métodos:

• Se construyó una proteína híbrida mediante la fusión de la proteína Tat del VIH-1 con la proteína de la capa del bacteriófago MS2, una proteína de unión al ARN.
• El elemento de respuesta de trans-activación (TAR) en la repetición terminal larga (LTR) del VIH-1 fue reemplazado por la secuencia del operador MS2, el ARN diana para la proteína de la capa.
• Se realizó un análisis mutacional de la secuencia del operador y las deleciones dentro de la proteína Tat para evaluar su impacto en la trans-activación.

Principales resultados:

• La proteína híbrida Tat-coat transactivó con éxito las LTR del VIH-1 que contienen la secuencia TAR nativa o la secuencia del operador.
• Las mutaciones que debilitan la unión de la proteína de la capa al operador in vitro dieron como resultado una disminución de la trans-activación in vivo.
• Las deleciones dentro de la porción Tat de la proteína híbrida permitieron la identificación de los dominios de activación de Tat y de unión al ARN.

Conclusiones:

• La trans-activación mediada por Tat del VIH-1 puede ocurrir independientemente del ARN TAR y de las proteínas de unión al ADN.
• Tat ejerce sus efectos sobre la transcripción del VIH-1 a través de la interacción directa con la estructura del bucle del ARN del tallo TAR.