Secreción de productos intermedios de ensamblaje de inmunoglobulina M en presencia de agentes reductores

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología celular Biología celular.
• Bioquímica de las proteínas Bioquímica de las proteínas

Sus antecedentes:

• Las proteínas mal plegadas o desensambladas suelen retenerse intracelularmente, a menudo en el retículo endoplasmático, lo que dificulta su transporte a través de la vía secretora.
• La inmunoglobulina M secretada (IgM) requiere polimerización, y su residuo de cisteína terminal C (575) está implicado en la retención de subunidades no polimerizadas.
• Las células plasmáticas secretan IgM polimérico, mientras que los linfocitos B sintetizan pero no secretan IgM a menos que esté polimerizado.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel de los agentes reductores en la secreción de los intermediarios de ensamblaje de IgM.
• Explorar la posible participación de grupos de tiol libres en la retención de proteínas intracelulares dentro de la vía secretora.

Principales métodos:

• Tratamiento de células B y de plasma con agentes reductores en medio de cultivo.
• Evaluación de la secreción de IgM y la liberación intermedia del ensamblaje.
• Evaluación de la secreción de la cadena de unión libre (J).
• Monitoreo de la viabilidad celular y la glicosilación terminal.
• Prueba del efecto sobre la retención del retículo endoplasmático mediada por KDEL.

Principales resultados:

• Los agentes reductores inducían la secreción de productos intermedios de ensamblaje de IgM tanto de las células B como de las células plasmáticas.
• Se secretaron cadenas de unión libre (J) en presencia de agentes reductores, incluso cuando no formaban parte de IgM o IgA.
• Las concentraciones de los agentes reductores utilizados no afectaron la viabilidad celular, la glicosilación terminal o la retención mediada por KDEL.

Conclusiones:

• Es probable que los grupos de tiol libres jueguen un papel en la prevención del transporte sin obstáculos de proteínas a través de la vía secretora.
• Las interacciones que involucran grupos de tiol, ya sea entre intermediarios de ensamblaje o con proteínas del retículo endoplasmático, pueden causar retención.
• La modulación del potencial redox intracelular o la mutagenesis dirigida al sitio de los residuos de cisteína podría superar potencialmente este mecanismo de retención.