El receptor de progesterona estimula la transcripción del virus del tumor mamario del ratón en un sistema libre de...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Regulación genética Reglamento genético.
• Acción de la hormona esteroide hormona de acción.

Sus antecedentes:

• Los receptores de esteroides modulan la actividad génica uniéndose a los elementos de respuesta hormonal (HREs) del ADN.
• Se establece la identificación de dominios para la unión hormonal, la interacción HRE y la transactivación, pero la reproducción libre de células de la transactivación es un desafío.

Objetivo del estudio:

• Establecer un ensayo funcional libre de células para el estudio de la transactivación del receptor de la hormona esteroide.
• Para investigar el mecanismo de activación de la transcripción mediada por el receptor de progesterona.

Principales métodos:

• Desarrollo de un sistema crudo de transcripción in vitro.
• Utilizó el receptor nativo de progesterona del útero de conejo y el promotor del virus del tumor mamario del ratón (MMTV).
• Evaluó el papel del HRE y el sitio de unión del factor nuclear-I a través de mutaciones y análisis de competencia.

Principales resultados:

• Se ha demostrado hasta 10 veces el aumento de la transcripción del promotor MMTV utilizando el receptor de progesterona in vitro.
• Se confirmó que la unión del receptor al MMTV-HRE es esencial para el efecto estimulante.
• Encontró que el sitio de unión del factor nuclear-I no era esencial para esta estimulación de la transcripción in vitro.

Conclusiones:

• El ensayo libre de células desarrollado reproduce efectivamente la transactivación mediada por el receptor de progesterona.
• Este ensayo requiere la unión de ligandos funcionales para la actividad de transactivación.
• El sistema proporciona una herramienta valiosa para diseccionar los mecanismos de activación de la transcripción mediada por la hormona esteroide.