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Empalme regulado del tercer intrón del elemento transponible de Drosophila P in vitro: represión somática
1Whitehead Institute for Biomedical Research, Nine Cambridge Center, MA 02142.
Science (New York, N.Y.)
|June 8, 1990
Resumen
El empalme específico del tejido en Drosophila está regulado por una proteína de 97-kD que inhibe el empalme del precursor del ARN mensajero (pre-ARNm). Esta interacción ARN-proteína explica la represión somática del empalme del elemento P en Drosophila.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Genética La genética.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- El empalme alternativo de los precursores del ARN mensajero (pre-ARNm) regula la expresión génica en las células eucariotas.
- La comprensión de los mecanismos bioquímicos del empalme alternativo requiere sistemas in vitro.
- El empalme específico del tejido del tercer intrón (IVS3) del elemento Drosophila P es crucial para la regulación de la transposición del elemento P.
Objetivo del estudio:
- Aclarar los mecanismos bioquímicos que subyacen al empalme específico del tejido del elemento P de Drosophila IVS3.3.
- Para identificar los componentes en los extractos de células somáticas de Drosophila que inhiben el empalme IVS3.
- Investigar el papel de las interacciones ARN-proteína en la regulación del empalme alternativo.
Principales métodos:
- Ensayos de empalme in vitro utilizando sustratos de pre-ARNm del elemento P de Drosophila IVS3 y extractos de células heterólogas humanas y de Drosophila.
- Pruebas de complementación para detectar componentes inhibidores en extractos de células somáticas de Drosophila.
- Ensayos bioquímicos para las proteínas de unión al ARN de Drosophila.
Principales resultados:
- Los pre-ARNm IVS3 del elemento P de Drosophila se empalmaron in vitro en extractos de células humanas, pero no en extractos de células somáticas de Drosophila.
- Se identificó una proteína de 97 kilodaltones (kD) que interactúa específicamente con las secuencias de exones 5' de IVS3.
- La inhibición del empalme IVS3 in vitro se correlacionó con la unión de la proteína 97-kD a estas secuencias.
Conclusiones:
- El empalme específico del tejido del elemento IVS3 de Drosophila P implica una represión somática mediada por interacciones específicas de ARN-proteína.
- Una proteína de 97-kD actúa como un represor al unirse a las secuencias de exones 5 ', inhibiendo el empalme IVS3 en las células somáticas.
- Este hallazgo proporciona información sobre los mecanismos moleculares que controlan el empalme alternativo y la regulación génica.