Identificación de una proteína de unión a lacosamida utilizando una estrategia de cebo de afinidad y reportero...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica es la bioquímica.
• Farmacología Farmacología.
• Biología Química Biología química.

Sus antecedentes:

• La identificación de socios de unión de drogas de baja afinidad es un desafío.
• Los métodos existentes pueden carecer de especificidad o eficiencia para las interacciones de afinidad modesta.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar una nueva estrategia de cebo de afinidad y reportero químico (AB&CR) para elucidar las interacciones fármaco-receptor.
• Para identificar a los socios de unión del medicamento antiepiléptico lacosamida.

Principales métodos:

• Utilizó un agente AB&CR basado en lacosamida para el etiquetado covalente de proteínas de unión.
• Se utiliza la espectrometría de masas para la identificación del sitio y la calorimetría isotérmica para el análisis de las interacciones.
• Realizó experimentos de estereospecificidad y competencia para confirmar eventos vinculantes.

Principales resultados:

• La estrategia AB&CR preferentemente adujo 14-3-3 ζ en los lisatos del cerebro de roedores.
• La adducción de lacosamida al 14-3-3 ζ fue estereospecífica y dependiente de la xantina.
• La espectrometría de masas identificó la lisina 120 (K120) como el sitio de adducción en 14-3-3 ζ.
• La calorimetría isotérmica confirmó la interacción entre el 14-3-3 ζ y la xantina.

Conclusiones:

• La estrategia AB&CR es efectiva para identificar objetivos de drogas de afinidad modesta.
• 14-3-3 ζ es un socio de unión directa de la lacosamida, con la xantina que modula esta interacción.
• Este trabajo proporciona información sobre el mecanismo molecular de la lacosamida y las posibles interacciones fármaco-metabolito.