Interacción específica del factor de terminación de la transcripción murina TTF I con las polimerasas de ARN clase I

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Reglamento genético Reglamento genético.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La terminación de la transcripción de genes ribosómicos es crucial para la homeostasis celular.
• La secuencia de la caja de Sal y la proteína TTF I median la terminación de la transcripción en los genes ribosómicos del ratón.
• El procesamiento post-transcripcional de las transcripciones primarias implica un recorte dependiente de la secuencia.

Objetivo del estudio:

• Para investigar si la unión de TTF I a la caja de Sal causa impedimento estérico para cualquier ARN polimerasa.
• Determinar la especificidad de TTF I en el bloqueo del alargamiento de la transcripción por diferentes polimerasas de ARN.

Principales métodos:

• Ensayos de transcripción in vitro utilizando TTF I purificado y varias polimerasas de ARN.
• Prueba del efecto de TTF I en el alargamiento de la transcripción por la ARN polimerasa I en ratones y levaduras.
• Evaluación del impacto de TTF I en las polimerasas heterólogas, incluidas las polimerasas de ARN eucariota II y III, y las polimerasas de ARN bacteriano / fago.
• Comparando el efecto de TTF I con la conocida función inhibidora del represor lac.

Principales resultados:

• TTF I termina específicamente la transcripción mediada por la ARN polimerasa I a través de especies divergentes (ratón, levadura).
• TTF I no impide el alargamiento de la transcripción por las polimerasas de ARN II, III, E. coli o la polimerasa de ARN T3 de los bacteriófagos.
• El lacrepresor que se une a su secuencia operadora inhibe el alargamiento tanto por la ARN polimerasa I como por la II.

Conclusiones:

• La función de TTF I en la terminación de la transcripción es específica de la ARN polimerasa I.
• TTF I actúa como un factor específico de terminación de la transcripción, no como un bloqueador general de la elongación.
• La especificidad de TTF I pone de relieve los distintos mecanismos de regulación de la transcripción por diferentes proteínas de unión al ADN.