Proteína secretada por A. T. cruzi inmunológicamente relacionada con el componente del complemento C9: evidencia de...

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• Parasitología Parasitología.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• * Trypanosoma cruzi, el agente causante de la enfermedad de Chagas, invade las células huésped al entrar en vacuolas ácidas.
• * La fuga del parásito de estas vacuolas hacia el citosol del huésped es crucial para la infección.
• * El bloqueo de la acidificación de la vacuola impide la fuga de parásitos, lo que sugiere un papel para los mecanismos activados por el ácido.

Objetivo del estudio:

• * Para investigar el papel de una hemolisina ácido-activa secretada por T. cruzi en la ruptura de la membrana del fagosoma.
• * Identificar y caracterizar la proteína responsable de la citotoxicidad y la permeabilización de la membrana.

Principales métodos:

• * Ensayos de citotoxicidad de supernatantes de T. cruzi en células nucleadas a pH ácido.
• * Purificación y copurificación de proteínas con actividad citolítica.
• * Generación de anticuerpos contra el componente del complemento humano C9 (C9) para la detección de proteínas.
• * Estudios electrofisiológicos utilizando bicapas planas de fosfolípidos para evaluar la formación de canales.
• * Inmunocitoquímica para localizar la proteína dentro de las células infectadas.

Principales resultados:

• * Los supernatantes de T. cruzi exhibieron citotoxicidad hacia las células nucleadas a un pH de 5.5.
• * Se identificó una proteína, designada TC-TOX, que muestra reactividad cruzada con anticuerpos contra el C9 humano.
• * TC-TOX copurificado con la actividad citolítica observada.
• *Fracciones activas que contienen actividad de canales iónicos inducida por TC-TOX en las bicapas lipídicas.
• * La inmunocitoquímica confirmó la localización de TC-TOX dentro de los fagosomas que contienen parásitos.

Conclusiones:

• * TC-TOX es una proteína citotóxica activada por ácido secretada por T. cruzi.
• * El TC-TOX forma poros transmembranares, lo que probablemente contribuye a la ruptura de la membrana del fagosoma.
• * Esta formación de poros facilita el escape del parásito desde el fagosoma hacia el citosol de la célula huésped.