La unión específica de la secuencia de Ets-1 humano al potenciador del gen alfa del receptor de células T

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• La expresión del gen alfa del receptor de células T humanas (TCR) está controlada por un potenciador específico de células T ubicado en el 3' del segmento del gen alfa C.
• Este potenciador tiene dos sitios críticos de unión, T alfa 1 y T alfa 2, para las proteínas nucleares esenciales para su actividad.

Objetivo del estudio:

• Para identificar los factores de transcripción que interactúan con el sitio de unión T alfa 2 del potenciador alfa TCR.
• Para aclarar el papel de estos factores en la regulación de la expresión génica alfa TCR.

Principales métodos:

• Se empleó un protocolo de expresión lambda gt11 para aislar un ADN complementario (ADNc) que codifica una proteína de unión T alfa 2.
• Se usó la secuenciación del ADN para identificar el gen clonado.
• Se realizaron ensayos de unión con una proteína de fusión beta-galactosidasa-Ets-1 y oligonucleótidos mutados.

Principales resultados:

• El clon de ADNc aislado fue identificado como el proto-oncogén humano ets-1.
• La proteína de fusión Ets-1 se une específicamente al sitio T alfa 2 dentro de una región de pares de 17 bases.
• Las mutaciones dentro de esta secuencia de unión a Ets-1 abolieron tanto la unión a Ets-1 como la actividad del potenciador alfa de TCR en las células T.

Conclusiones:

• Ets-1 se une de una manera específica de la secuencia al potenciador alfa TCR humano.
• El proto-oncogén regulado en el desarrollo, Ets-1, juega un papel importante en la regulación de la expresión génica alfa TCR.