Los productos de ARN DICER y DROSHA específicos del sitio controlan la respuesta al daño del ADN

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• Biología celular Biología celular.

Sus antecedentes:

• Los ARN no codificantes (ARNnc) regulan varios procesos celulares.
• La vía de respuesta al daño del ADN (DDR, por sus siglas en inglés) detiene la proliferación celular tras el daño del ADN.
• DICER y DROSHA son RNasas conocidas involucradas en la biogénesis de ARN pequeño para la interferencia de ARN (RNAi).

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel de los productos de ARN DICER y DROSHA en la activación de la DDR.
• Para identificar nuevos reguladores de la activación del DDR.
• Para explorar la función de los ARN pequeños en respuesta al daño del ADN.

Principales métodos:

• Estudió la formación de focos DDR y ensayos de puntos de control en células humanas, de ratón y de pez cebra.
• Utilizó tratamiento de RNasa A para evaluar la dependencia del ARN de los focos DDR.
• Realizó secuenciación profunda de ARN y analizó la activación de DDR en rupturas de doble hebra de ADN único.
• DDRNAs sintetizados y probados in vitro y en células tratadas con RNasa-A.

Principales resultados:

• DICER y DROSHA, pero no los factores de RNAi aguas abajo, son cruciales para la activación de DDR.
• La formación de focos DDR es sensible a la RNasa A y puede ser restaurada por ARN dependientes de DICER/DROSHA.
• Se identificaron pequeños ARN específicos del sitio, llamados DDRNA, necesarios para la formación de focos DDR.
• Los DDRNA funcionan de una manera dependiente del complejo MRE11RAD50NBS1.
• Los DDRNA sintetizados son suficientes para restaurar la DDR en ausencia de otros ARN celulares.

Conclusiones:

• Una nueva clase de ncRNAs, DDRNAs, controla directamente la activación de DDR en los sitios de daño del ADN.
• DICER y DROSHA juegan un papel crítico, hasta ahora no reconocido, en el inicio de la DDR.
• Estos hallazgos revelan un vínculo no anticipado entre la biogénesis de ARN pequeño y la señalización de daños en el ADN.