La fosforilación de la tirosina por CTD perjudica el reclutamiento del factor de terminación a la ARN polimerasa II

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Expresión génica de la expresión génica.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• El dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II regula la transcripción mediante factores de reclutamiento.
• El CTD comprende repeticiones heptapeptídicas conservadas.
• Los patrones de fosforilación de la CTD son cruciales para coordinar el ciclo de transcripción.

Objetivo del estudio:

• Para investigar nuevos sitios de fosforilación en la levadura ARN polimerasa II CTD.
• Determinar el impacto funcional de la fosforilación de Tyr sobre el reclutamiento de factores durante la transcripción.
• Para aclarar el papel de la fosforilación de CTD en la coordinación de las fases del ciclo de transcripción.

Principales métodos:

• Análisis de la CTD de la ARN polimerasa II de ARN fosforilada en levaduras.
• Pruebas bioquímicas para evaluar el factor de unión al CTD.
• La inmunoprecipitación de la cromatina para mapear los patrones de fosforilación in vivo.

Principales resultados:

• La Levadura ARN polimerasa II CTD es fosforilada en Tyr (t) además de otros sitios.
• La fosforilación de Tyr (1) mejora la unión del factor de alargamiento Spt6.
• Tyr(1) la fosforilación inhibe el reclutamiento de los factores de terminación Nrd1, Pcf11 y Rtt103.
• CTD Tyr(1) la fosforilación se regula espacialmente durante la transcripción, excluyendo los factores de terminación de los cuerpos genéticos.

Conclusiones:

• La fosforilación de CTD, incluso en Tyr{1), actúa como un mecanismo regulador clave.
• Los diferentes patrones de fosforilación dictan el reclutamiento de factores y la progresión del ciclo de transcripción.
• Un código extendido de CTD, basado en la fosforilación de Tyr{1), Ser{2), y Ser{5), explica la coordinación de la transcripción.