Análogo del cofactor Se-adenosil-L-selenometionina como reportero de la metilación de las proteínas

Área de la Ciencia:

• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología Química Biología química.
• La proteómica es la proteómica.

Sus antecedentes:

• La metilación post-traducional por metiltransferasas dependientes de S-adenosil-L-metionina (SAM) es crucial para la función de las proteínas en la salud y la enfermedad.
• Los reporteros químicos existentes para las proteínas metiltransferasas tienen limitaciones debido a la incompatibilidad con las enzimas nativas.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un nuevo reportero químico para examinar las funciones de las proteínas metiltransferasas.
• Introducir ProSeAM (Se-adenosil-l-selenometionina propargílica) como un sustituto SAM versátil para el perfil de actividad de la metiltransferasa.

Principales métodos:

• Utilizó ProSeAM como un sustituto de SAM para el etiquetado de sustratos por múltiples proteínas metiltransferasas.
• Empleó cicloadición azida-alquina catalizada por cobre (Click chemistry) con sondas de azida fluorescentes y basadas en afinidad.
• Realizó visualización de fluorescencia en gel y análisis proteómico para perfilar sustratos de metiltransferasa.

Principales resultados:

• ProSeAM fue procesado con éxito por varias proteínas metiltransferasas para el etiquetado de sustratos.
• Demostró la utilidad de ProSeAM en el perfilado de sustratos de metiltransferasa endógenos en diversos contextos celulares.
• Mostró la estabilidad de ProSeAM en comparación con el SAM propargílico a base de azufre, que se descompone rápidamente a pH fisiológico.

Conclusiones:

• ProSeAM es una sonda química conveniente y eficaz para el estudio de las actividades endógenas de la proteína metiltransferasa.
• La metodología desarrollada facilita un etiquetado y perfilado más amplio del sustrato, avanzando la investigación en metilación.
• ProSeAM ofrece una alternativa estable para investigar las funciones de la metiltransferasa en estudios fisiológicos y patológicos.