El hidroximetiluracilo glucosilado, base de ADN J, impide la lectura transcripcional en Leishmania

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• Parasitología Parasitología.

Sus antecedentes:

• La base de ADN J (β-D-glucosil-hydroxymethyluracil) es una timina modificada que se encuentra en los tripanosomas y la Leishmania.
• Aunque predominantemente se encuentra en las repeticiones teloméricas, la función de la base interna J no estaba clara anteriormente.

Objetivo del estudio:

• Para investigar la ubicación y la función de la base interna del cromosoma J en Leishmania.
• Determinar el papel de la proteína de unión J 2 (JBP2) en la biosíntesis de la base J y su impacto en la transcripción.

Principales métodos:

• El nocaut genético de JBP2 en Leishmania para reducir los niveles de base J.
• Cultivo de células knockout JBP2 en un medio que contiene BrdU.
• Análisis de los sitios de terminación de la ARN polimerasa II y lectura transcripcional.

Principales resultados:

• La mayoría de las bases no teloméricas J se encuentran en los sitios de terminación de la ARN polimerasa II interna.
• El nocaut de JBP2 redujo significativamente tanto la base telomérica como la base interna J.
• La pérdida de la base interna J dio lugar a una lectura transcripcional masiva superior a 100 kb en los sitios de terminación.

Conclusiones:

• La base J es esencial para la terminación eficiente de la transcripción de la ARN polimerasa II.
• La ausencia de la base interna J conduce a una lectura transcripcional letal en Leishmania.