Cuantificación multiplexada de la expresión proteica y la fosforilación basada en nanopolímeros funcionalizados...

Área de la Ciencia:

• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La señalización celular.

Sus antecedentes:

• La medición precisa de la señalización celular requiere distinguir los eventos de fosforilación de los niveles totales de proteínas.
• Los métodos existentes a menudo se enfrentan a desafíos en la cuantificación multiplexa y la diferenciación de estos dos parámetros.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un nuevo método para la cuantificación multiplexa de la fosforilación y la expresión de proteínas.
• Introducir un nanopolímero soluble funcionalizado, pIMAGO, como herramienta para el análisis preciso de la señalización celular.

Principales métodos:

• Funcionalización de un nanopolímero soluble (pIMAGO) con iones Ti (IV) para la quelación de fosfoproteínas y etiquetas fluorescentes infrarrojas.
• Utilizando pIMAGO para ensayos de competencia directa para detectar simultáneamente la fosforilación y los niveles totales de proteínas en las microplacas.
• Desarrollar una estrategia para distinguir claramente las señales de fosforilación de los cambios en la expresión de proteínas.

Principales resultados:

• Se ha demostrado la cuantificación multiplexa de la fosforilación y la expresión de proteínas utilizando el nanopolímero funcionalizado.
• Se ha logrado una alta especificidad en la quelación de fosfoproteínas con iones Ti (IV).
• Permitió la detección simultánea de la fosforilación y la cantidad total de proteínas en el mismo ensayo.

Conclusiones:

• El nanopolímero pIMAGO ofrece una nueva y poderosa herramienta para perfilar con precisión la transducción de señales celulares.
• Esta estrategia tiene amplias aplicaciones potenciales en el monitoreo de las vías de señalización celular y el descubrimiento de nuevos eventos de señalización en estados sanos y enfermos.